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1、原理及适用范围
大肠杆菌(Escherichia coli)和大肠菌群(Coliform)都是存在于温血动物肠道和粪便的细菌,是条件性致病菌,主要造成水体污染,也可能引起食物中毒的发生。大肠杆菌大肠菌群检测板是一种预先制备好的一次性培养基产品,可以同时检测大肠杆菌和大肠菌群,含有大肠菌选择性培养基、冷水可溶性的吸水凝胶和半乳糖苷酶(GAL)和葡萄糖醛酸酶(GUD)指示剂。大肠杆菌显蓝色,其他大肠菌群显红色,蓝点加上红点为总的大肠菌群数。本产品适合于食品及原料中大肠菌群的计数,如消毒牛乳、冷饮和调味品等样品的检测,也可用于表面的卫生检测。 执行标准:中华人民共和国国家标准《食品安全国家标准 食品微生物检验 大肠埃希氏菌计数》(GB 4789.38);中华人民共和国出入境检验检疫行业标准《食品中大肠菌群和大肠杆菌快速计数法——PetrifilmTM 检测板法》(SN/T 1896)。
1、原理及适用范围
大肠杆菌(Escherichia coli)和大肠菌群(Coliform)都是存在于温血动物肠道和粪便的细菌,是条件性致病菌,主要造成水体污染,也可能引起食物中毒的发生。大肠杆菌大肠菌群检测板是一种预先制备好的一次性培养基产品,可以同时检测大肠杆菌和大肠菌群,含有大肠菌选择性培养基、冷水可溶性的吸水凝胶和半乳糖苷酶(GAL)和葡萄糖醛酸酶(GUD)指示剂。大肠杆菌显蓝色,其他大肠菌群显红色,蓝点加上红点为总的大肠菌群数。本产品适合于食品及原料中大肠菌群的计数,如消毒牛乳、冷饮和调味品等样品的检测,也可用于表面的卫生检测。 执行标准:中华人民共和国国家标准《食品安全国家标准 食品微生物检验 大肠埃希氏菌计数》(GB 4789.38);中华人民共和国出入境检验检疫行业标准《食品中大肠菌群和大肠杆菌快速计数法——PetrifilmTM 检测板法》(SN/T 1896)。
2、操作方法
2.1 样品处理:取样品 25 mL(g)放入含有225 mL灭菌磷酸缓冲液(或生理盐水)的取样罐或均质袋内,制成1:10的样品匀液,根据样品污染程度及检验需要,可进一步制成10倍递增的样品稀释液。
2.2 接种:一般食品选2~3个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如饮用纯水和矿泉水等)可直接吸取原液进行检测。揭开大肠菌群检测板上层膜,用无菌吸管吸取1 mL样品匀液滴加到检测板内,迅速贴好上层膜并水平晃动检测板,让样品匀液均匀吸附在滤纸上,静置10 s左右,待样品匀液完全被吸附在滤纸上。每个稀释度接种两片。做好空白阴性对照。
2.3 培养: 将检测板叠在一起,倒置放于培养箱内。36℃±1℃,培养15~24h。
3、结果判读
培养后大肠杆菌显蓝色,其他大肠菌群显红色,蓝点加上红点为总的大肠菌群数。选择有阳性菌落的最高稀释度的检测板进行计数,然后乘以稀释倍数即为样品中每毫升(克)含有大肠菌群数。
4、附加说明
4.1 我国的食品卫生标准大多都以大肠菌群(Coliform)作为检测指标,而欧盟等许多国家则以大肠杆菌(E.coli)作为检测对象,因此,本产品对于出口食品和国际航空配餐等企业具有更广泛的应用前景。
4.2 样品匀液的pH值应在6.5~7.5之间,必要时分别用1mol/L NaOH或者1mol/L HCl调节。
4.3 大肠杆菌大肠菌群检测板对纯菌的检测灵敏度可达100 cfu/mL。
4.4 一般食品对于大肠菌群的要求都比较严格,如果检测板上有成片的红点,或者中央没有红点,但边缘有很多红点,一定是已经严重超标,建议按“多不可计”来报告。
4.5注意使用过的检测板上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。