W-2型食品微生物采样检测箱 使用说明
一、前言
二、餐饮具大肠菌群检测纸片 使用说明
三、菌落总数测试片 使用说明
四、食品、饮料大肠菌群快速检验纸片 使用说明
五、水质大肠菌群快速检验纸片 使用说明
六、霉菌酵母菌快速检验纸片 使用说明
七、沙门氏菌测试片 使用说明
八、便携式恒温培养箱 使用说明
九、食品微生物检测的采样

一、前言
在不具备无菌室或超净台等设备的情况下，又想及早得知样品被微生物污染的概略情况，可采取食品微生物采样检测箱进行检测。
防泄漏不锈钢制酒精灯的使用见右图(点击放大)。
大肠菌群（17个菌落）
大肠菌群 （满视野）

二、餐饮具大肠菌群检测纸片 使用说明
采样方法
随机抽取消毒后准备使用的各类食具(碗、盘、杯等)，取样量可根据大、中、小不同饮食行业每次采样6～10件，每件贴纸片两张，每张纸片面积25cm2(5cm╳5cm)用无菌生理盐水湿润大肠菌群检测用纸片后，立即贴于食具内侧表面，30秒后取下，置于无菌塑料袋内。

筷子以5只为一件样品，用毛细吸管吸取无菌生理盐水湿润纸片后，立即将筷子进口端约5cm)抹试纸片，每件样品抹拭两张，放入无菌塑料袋内。

检验方法
将已采样的纸片置37℃恒温培养箱中培养16～18h，若纸片保持紫蓝色不变或有红色斑点但斑点周围无黄晕为大肠菌群阴性，在红色斑点周围有黄晕或纸片变黄并在黄色背景上呈现红色斑点或片状红晕为阳性。

卫生指标
在50 cm2的纸片上（即两片纸片上），不得有大肠菌群阳性结果出现。如图：

三、菌落总数测试片 使用说明
本品可用于各类食品及饮用水中菌落总数的测定，由细菌营养培养基、吸水凝胶和酶显色剂等组成。与传统方法相比，省去了配制培养基、消毒和培养器皿的清洗处理等大量辅助性工作，随时可以开始进
菌落数少时的情况
菌落数多时的情况
行抽样检测，而且操作简便，通过酶显色剂的放大作用，使菌落提前清晰地显现出来，培养十几小时就开始出现红色菌斑，非常适合于食品生产企业产品自检和食品卫生检验部门使用。

W-2型食品微生物采样检测箱使用方法：
1．取样品25g（或mL）放入含有225mL无菌水的玻璃瓶内，经充分振摇做成1:10的稀释液，用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL，注入含有9mL灭菌水的试管内，用1mL灭菌吸管反复吸吹做成1:100的稀释液，以此类推，做出1:1000等稀释度的稀释液，每次换一支吸管。
2．一般食品选3个稀释度进行检测，含菌量少的液体样品（如食用纯水和矿泉水等）可直接用原液检测。将检验纸片水平放台面上，揭开上面的透明薄膜，用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液1mL，均匀加到中央的圆圈内，轻轻将上盖膜放下，静置5分钟。
3．从中间向周围轻轻推刮，使水分在圆圈内均匀分布，并将气泡赶走。
4．将加了样的检验纸片每6片叠放在一起，放入自封袋中，平放在37℃培养箱内培养15-24小时。
5．细菌在纸片上生长后会显示红色斑点，选择菌落数适中（10-100个）的纸片进行计数，乘以稀释倍数后即为每克（或毫升）样品中所含的细菌菌落总数。菌落数在100以内时，按其实有数报告，大于100时，用二位有效数字，在二位有效数字后面的数字，以四舍五入方法计算，后面的0用10的指数来表示。

计数原则、报告方式及说明
1. 通常选择菌落在10-100个之间的纸片进行计数，乘以稀释倍数报告之（见表例1）。
2. 若有两个稀释度的菌落数在10-100个之内，两者的比值小于2，则取其平均数，若大于2，则用值小者（见表例2、例3）。
3. 若三个稀释度的菌落数都有在10-100个之内，应选择二个低数值的平均数（见表例4）。
4. 若三个稀释度的菌落数均小于10个或大于100个时，应重新试用更低或更高的稀释度进行菌落计数；或采用均小于数量标准的最小值，或采用均大于数量标准的最大值（见表例5、例6）。

5. 快速测试片法比培养皿培养法的检测时间缩短了1倍多，菌落显现率目前为80％，在菌落计数后乘以1.2，两种方法可达同等效果，食品生产企业用其作为产品质量监控时乘以 1.3或1.4后，相当于提高了产品质量卫生标准。
6. 揭开上盖膜，用接种针挑取凝胶上的菌落可作进一步的分离和鉴定。使用过的纸片上带有活菌，需及时处理掉。

W-2型食品微生物采样检测箱保存条件
检测纸片需存放在10℃以下冰箱中，保质期为一年，铝箔袋打开后，未用的纸片要放回铝箔袋中封好，放到冰箱中，一个月内用完。

四、食品、饮料大肠菌群快速检验纸片 使用说明
大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一，目前已被广泛应用于食品卫生工作中。大肠菌群多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方，大肠菌群数的高低，表明了食品及食品生产过程中受污染的程度。本品可用于检测饮料、饮用纯水及各类食品中的大肠菌群数，与国标法中的九管法相对应，将原来几步的试验简化为一步，时间由一个星期左右缩短为十几个小时，而且为使用者省去了制备培养基的麻烦，非常适合于食品生产企业产品自检和食品卫生检验部门使用。 使用方法：
1.样品25克（或亳升）放入含有225亳升灭菌生理盐水或其他稀释液的玻璃瓶（瓶内置适当数量的玻璃珠）内，经充分振摇做成1：10的均匀释释液，用1毫升灭菌吸管吸取1：10稀释液，注入含有9亳升灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内，振摇试管做成1：100的稀释液，以此类推，每次换一支吸管；
2.选两个稀释度进行检测，一般情况下，饮料和饮用水采用原液和1：10两个稀释度，其他食品采用1：10和1：100这两个稀释度。本品每份由三片大纸片（二片重叠放在一个袋中算作一片）和六片小纸片组成，用10亳升灭菌吸管吸取10亳升原液或第一个稀释度的稀释液加到含有大纸片的塑料袋中，吸透后平放，做三个重复，再用1亳升灭菌吸管吸取1亳升同一稀释度的稀释液涂布到含有小纸片的塑料袋中，做三个重复。然后再取一支1亳升灭菌吸管吸取1亳升第二个稀释度的稀释液涂布到含有小纸片的塑料袋中，做三个重复；
3.将接种好的纸片（可叠放）放入37°C培养箱中培养15－24小时，若纸片变黄或在黄色背景上呈现红色斑点为大肠菌群阳性纸片，纸片保持紫兰色不变或在紫兰色背景上呈现红色斑点，但周围没有黄色均为大肠菌群阴性纸片，记录每个稀释度大肠菌群阳性纸片数，根据大肠菌群MPN表查出相应的大肠菌群数。如接种的第一个稀释度的稀释液为原液，应将表上查出的结果除以10，以此类推。

注：如果样品的酸碱度在pH7以下，应先用灭菌的Na2CO3溶液调整到pH7－8，否则接种后纸片马上变黄。

保存条件：
检测纸片需存在10℃以下冰箱中，保质期为一年，铝箔袋打开后，未用的纸片要放回铝箔袋中重新封好，放到冰箱中，一个月内用完。

五、水质大肠菌群快速检验纸片 使用说明

方法提要：
将不同量的水样接种到含有乳糖、显色剂和选择性培养基的快速检验纸片上，经培养后能够在纸片上生长并发酵乳糖产酸的即为大肠菌群阳性，根据阳性反应结果可测出原水样中大肠菌群的MPN（最可能数）值。

使用方法：
1.用灭菌吸管吸取10mL水样插入装有大纸片的塑料薄膜袋中，均匀涂布，共做5个重复；分别取1mL水样加到小纸片中，共接5个重复；另取1mL水样加到9mL无菌水中混匀，用1mL灭菌吸管分别吸取1mL（即0.1mL水样）,加到最后5片小纸片中。
2.将接种好的纸片平放于培养箱中，37℃培养15小时。
3.观察每片颜色变化，若纸片保持紫蓝色不变为大肠菌群阴性，纸片变黄或在黄色背景上呈现红色斑点或片状红晕为阳性。
4.根据每个稀释度的阳性反应纸片数，查MPN表可得出水样中大肠菌群的MPN值。

保存条件：
检测纸片需存在10℃以下冰箱中，保质期为一年，铝箔袋打开后，未用的纸片要放回铝箔袋中重新封好，放到冰箱中，一个月内用完。

六、霉菌酵母菌快速检验纸片 使用说明

霉 菌
酵母菌
本品可用于各类食品及饮用水中霉菌和酵母菌的计数，由霉菌营养培养基、吸水凝胶和酶显色剂等组成。与传统方法相比，省去了配制培养基、消毒和培养器皿的清洗处理等大量辅助性工作，随时可以开始进行抽样检测，而且操作简便，通过酶显色剂的放大作用，使菌落提前清晰地显现出来，培养时间由一周缩短为48-72小时，非常适合于食品生产企业产品自检和食品卫生检验部门使用。

使用方法：
1．取样品25g（或mL）放入含有225mL无菌水的玻璃瓶内，经充分振摇做成1:10的稀释液，用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL，注入含有9mL灭菌水的试管内，用1mL灭菌吸管反复吸吹50次做成1:100的稀释液，以此类推，每次换一支吸管。
2．一般食品选3个稀释度进行检测，含菌量少的液体样品（如食用纯水和矿泉水等）可直接用原液检测。将检验纸片水平放台面上，揭开上面的透明薄膜，用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液1mL，均匀加到中央的滤纸片上，然后轻轻将上盖膜放下，静置5分钟。
3．用手指先沿方格区边缘刮一下，防止水外流，然后再在中间轻轻推刮，使水分在纸片方格区内均匀分布，并将气泡赶走。 4．将加了样的检验纸片每15片叠放在一起，放入自封袋中，平放在37℃培养箱内培养48-72小时。
5．霉菌和酵母菌在纸片上生长后会显示蓝色斑点，霉菌菌落显示的斑点略大或有点扩散，酵母菌落则较小而圆滑，许多霉菌在培养后期全呈现其本身特有的颜色。选择菌落数适中（10-100个）的纸片进行计数，乘以稀释倍数后即为每克（或毫升）样品中霉菌和酵母菌的数目。

计数原则及报告方式：
1. 通常选择菌落在10-100个之间的纸片进行计数，乘以稀释倍数报告之（见例1）。
2. 若有两个稀释度的菌落数在10-100个之内，两者的比值小于2，则取其平均数，若大于2，则用值小者（见例2、例3）。
3. 若三个稀释度的菌落数都有在10-100个之内，应选择二个低数值的平均数（见例4）。
4. 若三个稀释度的菌落数均小于10个或大于100个时，应重新试用更低或更高的稀释度进行菌落计数；或采用均小于数量标准的最小值，或采用均大于数量标准的最大值（见例5、例6）。

另：揭开上盖膜，用接种针挑取凝胶上的菌落可作进一步的分离和鉴定。使用过的纸片上带有活菌，需及时处理掉。

保存条件：
检测纸片需存放在8℃以下冰箱中，保质期为一年，铝箔袋打开后，未用的纸片要放回铝箔袋中封好，放到冰箱中，一个月内用完。

七、沙门氏菌测试片 使用说明
1. 意义：沙门氏菌广泛存在于自然界中，是重要的肠道致病菌，可引起传染和流行。目前，分离鉴定沙门氏菌，包括健康人群带菌者调查和体检工作中，绝大部分实验室都还是应用增菌、分离、血清学鉴定传统的平板分离法，此法实验时间长且需要大量的实验前准备工作，同时还要挑取菌落、血清学实验等烦琐复杂的程序，费时费力，全过程需时至少4-7天．才能得出明确的诊断结果。近几年，把生物化学技术应用到微生物检验领域取得了很大的突破。通过在选择性培养基中加入专一性的酶显色剂，大大地简化了检测程序，15～24小时一步培养就可确定出病原菌的是否存在，不但使用方便，而且降低了成本，适合于各级检验部门使用。 2. 样品前处理：
2.1食品样品的处理方法：取待测样品25g(或mL)放入含有225mL无菌生理盐水的玻璃瓶内，经充分振摇做成1：10的稀释液。
2.2人体样品的处理方法：取从业人员体检肛拭或粘有病人粪便的棉签放入5mL灭菌GN增菌液中，经充分振摇后，于37℃增菌18～24小时。
3. 样品接种：将测试片水平放在台面上．揭开上盖膜．用灭菌吸管吸取稀释液O.5ml，均匀加到吸水滤纸上，然后轻轻将盖膜放下。
4. 培养：将加了样的测试片平放在37℃培养箱内培养15～24小时。
5. 结果观察：对测试片进行观察，呈紫红色的菌落为沙门氏菌；呈蓝色的菌落为其他大肠菌。
6.说明：对于经过烘烤加热或冷冻的食品样品，最好先用GN增菌液进行预增菌．使“致伤”、冷冻的沙门氏菌复苏，然后再行检测。

八、BX-2型 便携式恒温培养箱 使用说明
1、特点：
本仪器为便携式培养箱，重量约8 kg，移动方便，即可在实验室使用，又可随时移动车中现场使用。
2、主要技术参数：
工作室尺寸（mm）：200×250×200
外形尺寸（mm）：350×340×260
控温范围（℃）：外界～45
电源电压（V）：220
功率（W）：50
温度波动（℃）：±1

3、使用方法：
3.1将需培养的物品放入箱内，关好箱门。
3.2接通电源，打开电源开关，指示灯亮，表示工作正常，仪表显示工作室温度，然后将按码开关按到所需温度（如37.0℃），绿灯亮表示通电升温，红灯亮表示断电保温，红绿灯交替变化表示进入恒温状态，当仪器恒温30分钟后，仪表显示温度和设定基本一致。并可通过按码进行适当调节。

4. 注意事项：
4.1为保证使用安全，仪器外壳应与地线连接。
4.2仪器应放置在具有良好通风的条件内，相对湿度不大于85%，其周围不应放置易燃易爆及腐蚀性物品。
4.3工作室内物品摆放切勿过挤，以便于热量循环，使物品受热均匀。
4.4箱体内外应保持清洁，长期不用应盖好防尘罩，放置在干燥的室内。
4.5使用过程中，温度变化出现异常，应及时停机检查

九、食品微生物检测的采样 (详见箱内说明书)
（一）采样原则
1．代表性原则
2. 典型性原则
3．适时性原则
4．适量性原则
5．程序原则

（二）采样方法
1．采样用具、容器灭菌方法
2．无菌操作步骤
3．无菌采样注意事项
（三）采样记录
1． 现场采样记录
2．样本签封和编号
3. 采样单

（四）样本保存
1. 要保持样本原来的状态
2．易变质的样本要冷藏