当以空白试剂为参比调节仪器零点时，比色皿窗材料的吸收、内外窗面的散射以及溶剂的吸收等都被抵消，所得吸光度值完全由显色[wiki]溶液[/wiki]中待测离了浓度所决定。此时吸光度值与试液浓度一般呈线性关系。吸光度值与测定浓度不成直线关系，发生向下弯曲(负偏离)或向上弯曲(正偏离)的现象而偏离朗伯一比尔定律的主要原因如下。
(1)非单色光的影响紫外一可见分光光度讣使用连续光源和分光器分光，不可能得到真正理想的单色光；为保证在测量中能得到充分的光强，仪便携式防水溶解氧测定仪器必须保持一定的狭缝宽度。由狭缝射出后投射到被测[wiki]物质[/wiki]上的光，是一个有限宽度的谱带——光谱通带。随光谱通带宽度的增大，吸收光谱的分辨率降低，并偏离朗伯一比尔定律。
(2)非吸收光的影响 当来自出射狭缝的光的光谱通带宽度大于吸收光谱谱带时，投射在被测物质上的光就含有非吸收光。这不仅能使灵敏度降低，且能使校准曲线向横坐标轴弯曲而偏离朗伯一比尔定律。
(3)非平行光的影Ⅱ向 当入射光与比色皿的[wiki]光学[/wiki]面不垂直时，通过被测物质的实际光程就大于比色皿的厚度。这种情况所造成的影响很小，一般可忽略不计。
(4)散射的影响 当被测物质不均匀，其巾含有微小颗粒物，如悬浮物或胶态粒子等散射质点时，入射光通过该物质就会使部分光被散射而损失，从而减小了透射光的性度，增大了实际吸光度，导敛偏离朗伯一比尔定律。
(5)荧光的影响某些物质吸收光后能再新[wiki]辐射[/wiki]出波长和入射光波长相近的荧光而导致朗们一比尔定律失效。
(6)[wiki]化学[/wiki]反应的影响 在被测溶液中待测组分发发生解离、缔合、光化等作用，或与溶剂相互作都将使待测组分的吸收曲线发生明显的改变，如吸收峰的形状、位置、强度以及精密结构都会发生变化，从而导致偏离朗伯一比尔定律。
(7)溶剂的影响 溶剂对吸收光潜在的影响颇为最要。幅射能引起某化合物的分解而导致偏离朗们比尔定律。
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