在实验室工作中，验收新仪器或仪器使用一段时间后都要进行波长校正和吸光度校正。建议采用下述较为简便、实用的方法进行校正。
镨玻璃或钬玻璃都有若干特征的吸收峰，可用来校正分光光磁力搅拌器度计的波长标尺，前者用于可见光区，后者对紫外和可见光区都适用。K2CrO4标准溶液用来校正吸光度标度，即0.0400g K2CrO4溶解于1 L的0.05mol·L-1KOH溶液中制成标准溶液。于1cm光程的吸收池中，在25℃时用不同波长测得的吸光度值见表4.1。
表4.1 铬酸钾溶液的吸光度
一、分光光度计:又称光谱仪(spECtrometer)，是将成分复杂的光，分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780nm的可见光区和波长范围为200～380nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。钨灯的发射光谱：钨灯光源所发出的380～780nm波长的光谱光通过三棱镜折射后，可得到由红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫组成的连续色谱；该色谱可作为可见光分光光度计的光源。原理：分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光线透过测试的样品后，部分光线被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。单色光辐射穿过被测物质溶液时，被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度（光路长度）成正比，其关系如下式：A=-lg(I/I。)=-lgT=kLc式中:A为吸光度；I。为入射的单色光强度；I为透射的单色光强度光度计；T为物质的透射率；k为摩尔吸收系数；L为被分析物质的光程，即比色皿的边长；c为物质的浓度；物质对光的选择性吸收波长，以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后可用同样条件将该供试品配成溶液，测定其吸收度,即可由上式计算出供试品中该物质的含量。在可见光区，除某些物质对光有吸收外，很多物质本身并没有吸收但可在一定条件下加入显色试剂或经过处理使其显色后再测定,故又称比色分析。由于显色时影响呈色深浅的因素较多，且常使用单色光纯度较差的仪器，故测定时应用标准品或对照品同时操作。
